01 干細胞多久見(jiàn)效？持續時(shí)間多久？

回答這兩個(gè)問(wèn)題其實(shí)是很難的，但同時(shí)又是頻繁被問(wèn)到的問(wèn)題。還是做一個(gè)類(lèi)比吧，感冒了吃藥或者不吃藥，在感冒治愈之前我們是沒(méi)有任何人可以預測到這次感冒要持續多久。

“首先，每個(gè)人的應用情況是不同的，有些是亞健康（癥狀不一樣）、有些是疾?。ú》N不一樣），其中又涉及到性別、年齡、地域、遺傳、單病種和多病種、疾病進(jìn)展狀況等等的因素，造成個(gè)體之間的差異千差萬(wàn)別。

其次，輸注方式是不同的，動(dòng)脈、靜脈、局部注射以及是否聯(lián)合其它療法等。

再次，生活方式和作息習慣也會(huì )對進(jìn)入體內細胞的生存率和活性產(chǎn)生影響。

最后，使用的細胞類(lèi)型、細胞數量、間隔周期等因素也會(huì )導致最終結果不同。

總而言之，每一個(gè)我們可能想到的點(diǎn)，最終都會(huì )影響到細胞所能起到的效果以及持續性的問(wèn)題。”

目前比較普遍的規律是，幾分鐘到3天會(huì )有比較明顯的注射反應，之后的兩周內細胞會(huì )發(fā)生遷移產(chǎn)生生物反應，未來(lái)6-12周會(huì )逐漸產(chǎn)生療效反應，持續時(shí)間一年到幾年不等。

注射反應：有三個(gè)層面的意思，一是只要有外源性物質(zhì)的輸入都會(huì )引起我們相應的反應，二是極低概率的敏感體質(zhì)的人對細胞產(chǎn)生的反應，三是細胞本身產(chǎn)生的分泌物作用于人體產(chǎn)生的反應。

生物反應：是指細胞在各個(gè)器官遷移，在不同的微環(huán)境中釋放出不同細胞因子或者分化為相應類(lèi)型的功能細胞，相應的產(chǎn)生的微環(huán)境的變化給身體帶來(lái)的感覺(jué)。

療效反應：是指細胞已經(jīng)適應體內環(huán)境并在功能層面開(kāi)始運作，對我們的身體進(jìn)行修復或者抑制某些不好的反應，我們在主觀(guān)感受和生理指標上能夠實(shí)實(shí)在在得到的反饋。

效果持續多久這個(gè)問(wèn)題涉及到的東西就更復雜了，同樣的一批魚(yú)苗放到不同的池塘里面，中間的飼養方式不一樣，半年后捕獲，魚(yú)的重量、體型、顏色都會(huì )不一樣，類(lèi)似的道理同樣適用于細胞，每個(gè)人的體內環(huán)境不一樣，每個(gè)人的生活作息規律不一樣，造成的結果也完全不一樣。

現實(shí)中不乏這樣的例子，應用細胞就是為了天天喝酒，天天熬夜，天天放縱，這樣是不可取的，就如同傷口還沒(méi)有結痂脫落，我們動(dòng)不動(dòng)就去抓傷口，造成經(jīng)久不愈，細胞絕對不是神丹妙藥，更不是急救藥，也因此鄭重的勸誡所有人用了細胞還需要好好遵醫囑，作息規律，起碼也要等本錢(qián)足夠了再去揮霍，否則只能等著(zhù)吃后悔藥。

再說(shuō)一下效果持久和多久需要再補充的問(wèn)題。

我們的健康值就如同電池的電量一樣，從100到0，現在可能大多數的人處于75甚至是50。我們的電量即使只是在待機也在慢慢消耗，通過(guò)補充細胞或者其它方法都可以提高健康度即使達到100，也不會(huì )像之前那樣經(jīng)用，因為電池老化容量本身已經(jīng)出了問(wèn)題。

同樣75電量的手機，同樣在充電，一個(gè)什么也不玩，一個(gè)只是在聊微信，一個(gè)在玩游戲，想充到100的電量，需要的時(shí)間是不一樣的。

同樣50電量的手機，有些人覺(jué)得到30才需要充電，有些人覺(jué)得維持50也挺好，有些人覺(jué)得充到80才能放心。

所以，何時(shí)見(jiàn)效？效果多久？何時(shí)補充？取決于個(gè)體差異的健康狀況，取決個(gè)體差異的生活習慣，取決于個(gè)體差異的健康理念。

02 干細胞應用到底選擇第幾代？

當臨床應用干細胞治療時(shí)，選擇哪個(gè)代次的干細胞治療更加合適，是經(jīng)常被問(wèn)到的問(wèn)題。人分男女老少，而干細胞也有年輕和衰老之分，細胞代數也是影響臨床治療效果的重要因素。

我們先來(lái)看看細胞代次的概念：目前最主要的表述有兩種，一種是細胞世代，一種是傳代代數，具體見(jiàn)下表。

備注：P0為剛從組織分離出來(lái)的原代細胞，一般干細胞傳代擴增倍數為3-5倍，圖表中以3倍為例。

現在我們常說(shuō)的細胞代次是傳代代次，如果換算成細胞世代的話(huà)可以有一個(gè)粗略的對比，傳代代次的3代細胞相當于細胞世代的5代，傳代代次的4代細胞相當于細胞世代的6-7代，傳代代次的5代細胞相當于細胞世代的8代。依次類(lèi)推，中間不考慮損耗和各實(shí)驗室培養工藝和培養體系的差異，如果干細胞傳代擴增倍數用5倍來(lái)計算的話(huà)，傳代代次和細胞世代之間的差距是更大的。

理論上講，細胞代數越靠前，干細胞的干性也越強。但是干細胞在體外培養的過(guò)程中，干細胞有從組織微環(huán)境到體外培養環(huán)境的一個(gè)調整和適應過(guò)程，一部分不適應的細胞會(huì )被淘汰，所以在前兩代，干細胞基因組有著(zhù)不穩定的因素，可能不宜臨床應用。有研究顯示，通過(guò)核型分析發(fā)現，在前兩代細胞中，干細胞存在異常核型的比例偏高。就如間充質(zhì)干細胞（mesenchymal stem cells,MSCs）而言，臨床應用的最佳代數應該在3~6代。

目前臨床研究中，MSC應用較為常見(jiàn)的來(lái)源骨髓、脂肪、臍帶、胎盤(pán)等，本文以臍帶、脂肪、胎盤(pán)這三類(lèi)比較常見(jiàn)的來(lái)源進(jìn)行總結，針對不同來(lái)源間充質(zhì)干細胞，體外傳代培養后不同代次的一些生物學(xué)特性的變化（例如：細胞形態(tài)、細胞周期檢測、表面標記物檢測、染色體核型分析、相關(guān)基因表達及細胞因子的定量分析）。

人臍帶間充質(zhì)干細胞長(cháng)期體外傳代培養后其基本的干細胞生物學(xué)屬性, 如細胞表面免疫標志物和誘導多向分化潛能, 無(wú)顯著(zhù)性改變。長(cháng)期培養至20代, 未發(fā)現致病性或致瘤性基因變異。高代次(P20)hUC-MSCs的細胞增殖活性和端粒酶活性與早期低代次(P5)細胞無(wú)顯著(zhù)性差異。隨著(zhù)培養代次的增加, 細胞開(kāi)始出現老化, 尤以20代細胞表現最為明顯。

不同代次人臍帶間充質(zhì)干細胞的形態(tài)學(xué)觀(guān)察

體外傳代培養至第5、10代hUC-MSCs呈現完全相同的細胞形態(tài)與生長(cháng)排列方式, 均呈現長(cháng)梭狀貼壁生長(cháng), 輕度螺旋流水狀排列。第20代細胞呈現非常相似的長(cháng)梭狀貼壁生長(cháng), 但胞體略顯增大, 融合后局部排列紊亂。

已有研究顯示, 雖然高代次培養的hUC-MSCs染色體組型依然保持穩定,但至第7代時(shí)其端粒酶活性會(huì )有所下降。我們通過(guò)檢測人端粒酶逆轉錄酶活性亞單位基因的表達顯示, 第5、10和20代hUC-MSCs的端粒酶活性之間并沒(méi)有顯著(zhù)性差異; 且不同代次細胞呈現相似的生長(cháng)增殖曲線(xiàn), 表明它們的細胞增殖活力也無(wú)差異性。

雖然第20代hUC-MSCs依然保持與低代細胞類(lèi)似的干細胞生物學(xué)屬性、基因穩定性和生長(cháng)特征, 隨著(zhù)傳代培養時(shí)間的延長(cháng), 細胞開(kāi)始呈現一定程度的老化現象。鑒于過(guò)度的傳代培養會(huì )導致hUC-MSCs出現老化征象, 建議用于干細胞臨床治療的hUC-MSCs體外培養最好不超過(guò)第10代。

有研究分別對胎盤(pán)間充質(zhì)干細胞P5、P10和P15代細胞的增殖能力進(jìn)行了檢測，結果顯示P5代間充質(zhì)干細胞的增殖能力明顯高于P10和P15代，實(shí)驗結果表明，胎盤(pán)間充質(zhì)干細胞在體外培養時(shí)，隨著(zhù)細胞代次的增加，細胞會(huì )逐漸出現的老化。由于胎盤(pán)間充質(zhì)干細胞在P5代后增殖能力會(huì )逐漸的下降，所以作為臨床應用時(shí)最好選擇P5代以下的為宜。

染色體細胞核型沒(méi)有明顯易位和缺失等變化，相關(guān)基因表達量略有差異，培養基內分泌的細胞因子保持穩定。

研究表明（利用無(wú)血清培養基培養的）脂肪間充質(zhì)干細胞在傳代至5代的過(guò)程中，生物學(xué)特性及遺傳特性基本穩定，沒(méi)有明顯變化。初步揭示了脂肪間充質(zhì)干細胞體外傳代至第5代以?xún)瓤梢园踩褂谩?/p>

因此，代次太靠前或者太靠后都不是最好的選擇，同時(shí)也要考慮培養條件的因素才能做出最佳的選擇。

03 干細胞自體好還是異體好？

近幾天又多次遇到這個(gè)問(wèn)題，其實(shí)還真挺難回答，因為在不同的應用場(chǎng)景下，答案是不同的。

就好比，大家都會(huì )毫不猶豫的認為自家種的糧食、水果、蔬菜是最好的，但實(shí)際上現在很多專(zhuān)業(yè)的標準化和規范化的農場(chǎng)栽培的作物更嚴謹也更安全。只是說(shuō)自家種植的全過(guò)程我們是能把控的，照樣也會(huì )施肥打農藥，至于用量是否合理也不用管，只求心安理得，自己的永遠是最好的。

當然這里面涉及到別人種植的會(huì )亂來(lái)的情況，這個(gè)屬于道德層面的范疇，不在我們技術(shù)討論層面。

百度一下這個(gè)問(wèn)題，會(huì )有很多的答案出來(lái)，比如這個(gè)頻率出現會(huì )比較高：

真要揪這里面的問(wèn)題，可能一個(gè)篇幅都不夠，概念不清，定義不明，專(zhuān)業(yè)不熟。

自體有自體的好處，最大的優(yōu)勢在于不涉及倫理問(wèn)題(自取自用)，外源基因的風(fēng)險低（成體這么些年自體基因變化的風(fēng)險是不是也應該考慮一下）、排斥反應?。ú还苁亲泽w還是異體都是要在體外培養的，雖說(shuō)實(shí)驗室培養盡可能的模擬人體環(huán)境，但始終還是有差異的，從某種程度上來(lái)說(shuō)自體和異體接受了同樣的教育，都已經(jīng)不完全是它們最初的模樣）、不用配型（配型僅限用于某些特殊疾病，而這些情況下幾乎全部使用異體，自體那么好為啥還要異體的干嘛）等優(yōu)勢有待商榷，在沒(méi)有詳實(shí)的數據出來(lái)之前，不能自以為是。

結論：自體及異體造血干細胞移植后造血系統重建狀況無(wú)明顯差異。

異體有異體的優(yōu)勢，取材方便，不會(huì )對人體造成傷害，培養具有一致性和穩定性，但在某些只能或者優(yōu)先使用自體的情況下，異體自動(dòng)排到后面去。

還有一些公司的說(shuō)法我很難理解，自體干細胞全是優(yōu)點(diǎn)，異體干細胞全是缺點(diǎn)。我們來(lái)看一下全球已經(jīng)上市的細胞藥物和國內已經(jīng)申報的干細胞療法的統計，里面自體和異體的比例一目了然。

結論就是：不論是自體還是異體，都存在一定的風(fēng)險性，自體唯一占了便宜的地方就是在法規上，而且在相當一部分情況下自體取材會(huì )需要經(jīng)過(guò)很繁瑣的流程，在保證同樣的細胞質(zhì)量的前提下，應該由專(zhuān)業(yè)的醫生決定使用自體還是異體，甚至有些時(shí)候應該把主動(dòng)權交給消費者自己選擇，而我們應該做的只是如實(shí)告知利弊。

只有在應用達到一定的數量，有了更多的數據積累，我們才能更有資格去說(shuō)是哪種好，而不是單單從理論層面憑空想象。

04 干細胞到了體內到底能存活多久？

干細胞能治療多種疾病尤其是一些疑難雜癥，是不爭的事實(shí)，但是療效各有差異，還有一些是沒(méi)有療效的案例，我們不得不開(kāi)始從多個(gè)方面開(kāi)始研究，到底是什么因素影響了細胞的療效？

傳統的化學(xué)藥物也能治好很多的病，我們先來(lái)對比一下兩者的區別：

化學(xué)藥物是結構穩定的無(wú)生命物質(zhì)，干細胞是有生命的功能單位；

化學(xué)藥物有明確的半衰期，干細胞暫時(shí)沒(méi)有發(fā)現；

化學(xué)藥物有明確的作用靶點(diǎn)，干細胞通過(guò)多途徑實(shí)現功能；

化學(xué)藥物都是被動(dòng)吸收，干細胞通過(guò)趨化性主動(dòng)遷移；

化學(xué)藥物均一性穩定，干細胞的細胞周期并不同步。

化學(xué)藥物和干細胞一樣的地方在于，兩者都沒(méi)有在體內長(cháng)期滯留，而是隨著(zhù)時(shí)間的延長(cháng)逐漸被機體清除。

動(dòng)物試驗顯示，免疫系統越是健全的個(gè)體，免疫清除能力越強，干細胞在體內存活的時(shí)間就越短，免疫缺陷的機體，清除干細胞的能力就越慢。干細胞在體內被清除的速度還和輸注的途徑有一定的關(guān)系，靜脈、動(dòng)脈、局部定向輸注、不同類(lèi)型的干細胞等因素都會(huì )影響到干細胞輸注到體內之后的存活時(shí)間。

雖說(shuō)干細胞通過(guò)不同途徑的在不同動(dòng)物機體內的分布和代謝有過(guò)很多的研究，在不同的實(shí)驗室也會(huì )得出不一樣的結論，但是我們還是能通過(guò)數據的匯總得出一些結論：

干細胞在不同機體內存活的時(shí)間從幾天到幾個(gè)月不等；

靜脈、動(dòng)脈和局部注射（腦部、肌肉、心臟、肝臟、腰椎等）存活時(shí)間有差異；

自體和異體的干細胞回輸存活時(shí)間差異不大；

靜脈回輸的干細胞可以突破血腦屏障，在體內的遷移偏好于血管的走向；

清髓后干細胞的存活時(shí)間略有延長(cháng)，血管舒張劑對細胞的遷移和存活都有促進(jìn)作用；

靜脈回輸的干細胞剛開(kāi)始大部分被肺部截留，截留的細胞仍然可以通過(guò)因子的分泌減輕炎癥和修復組織，隨著(zhù)時(shí)間推遲肺部滯留的細胞向其它器官轉移；

干細胞的歸巢帶有一定的隨機性，在不同機體的分布有差異。

從目前的研究結果來(lái)看，不管是局部注射還是全身性注射，不管是自體干細胞還是異體干細胞，機體均會(huì )逐漸清除干細胞，清除速度與多因素有關(guān)，包括機體免疫系統、輸入途徑、細胞來(lái)源的組織、細胞供體的年齡、細胞體外培養時(shí)間的長(cháng)短等。

同時(shí)也因為干細胞趨化性的特點(diǎn)，健康機體和損傷機體的分布也不太一樣，如果機體有多處損傷的話(huà)，干細胞到達某一損傷部位的數量也會(huì )不一樣，尤其是有些隱形的疾病或損傷是我們所不能預見(jiàn)的，可能我們需要針對解決的部位成了漏網(wǎng)之魚(yú)，因為干細胞并不能分辨某種損傷的嚴重程度，無(wú)法進(jìn)行先急后緩的修復策略。   

干細胞歸巢是指自體或外源性的干細胞在多種因素的影響下，從血管內皮細胞定向性遷移至靶向組織并定植存活的過(guò)程。其中向缺血或損傷組織歸巢是間充質(zhì)干細胞重要特征。當機體組織器官缺血缺氧或者發(fā)生損傷后，通過(guò)釋放炎性因子(如白細胞介素1，腫瘤壞死因子α)和趨化因子(如基質(zhì)細胞衍生因子1)等多種成分入血活化間充質(zhì)干細胞，同時(shí)可以在損傷部位周?chē)纬膳潴w的濃度梯度，從而趨化間充質(zhì)干細胞沿濃度梯度向著(zhù)缺血缺氧的目標組織定向遷移。

也因此，單次干細胞回輸的效果不明顯或者不能持久，需要我們跟化學(xué)藥物有類(lèi)似的操作，就是按照療程，多久一次，一次多少量，首先起到一個(gè)比較明顯的效果，然后鞏固效果，最終達到從量變到質(zhì)變的目的。

就如同，在我們口渴的時(shí)候，一杯水可以解渴，一口水只能緩解我們口渴的狀態(tài)。

-END-

參考文獻：略

作者｜狼瓜校長(cháng)

審校編輯｜摩西