目的：分析單份非親緣臍血造血干細(xì)胞移植(sUCBT)的預(yù)后影響因素及臍血深低溫凍時(shí)間長短 與細(xì)胞活力、移植預(yù)后的相關(guān)性。

造血干細(xì)胞移植 (HscT)是多種惡性血液病、骨髓衰竭性疾病、實(shí)體腫瘤、遺傳代謝性疾病最有效的治療手段之一。由于臍血來源豐富、采集過程無傷害、HLA配型要求相對(duì)較低、免疫原性弱、發(fā)生移植物抗宿主病 (GVHD)的風(fēng)險(xiǎn)低等優(yōu)點(diǎn)，臍血造血干細(xì)胞移植 (UCBT)已被廣泛應(yīng)用于臨床，移植效果接近于骨髓移植。對(duì)于缺乏HLA全相合骨髓/外周血供體的患者，UCBT是較好的治療選擇。

一

一、病例

2007年3月15日至2013年l2月26日使用上海臍血庫提供的臍血進(jìn)行sUSCT的來自國內(nèi)28家醫(yī)院的137例患者 ，其中2007—2011年移植78例，2011 以后移植 59例。男性 84例 ，女性53例 ，中位年齡 6(1—47)歲?；颊咴l(fā)病以白血病為主(94例)，還包括骨髓增生異常綜合征9例，先天性疾病19例，實(shí)體瘤7例，其他疾病9例(6.6%).

二、移植基本特征

137例sUCBT的患者中，供受體性別相合59例，血型相合58例，供受體HLA配型 (A、B、DRB1位點(diǎn)血清學(xué)配型 )6/6相合47例，5/6相合68例，4/6相合22例。根據(jù)原發(fā)病類型、患者臨床狀況、移植醫(yī)院的不同，移植預(yù)處理方案及 GVHD預(yù)防方案的個(gè)體化差異較大，65．0%的患者采用白消安(Bu)為主的預(yù)處理方案，21.1%的患者采用全身照射(TBI)為主的預(yù)處理。

三 、臍血情況

137份臍血平均凍存時(shí)間(從臍血采集日期到臨床移植日期)為698(96～1968)d，凍存時(shí)間在1年以內(nèi)的臍血有36份 (26．3%)，凍存1～2年的有47份(34．3%)，2～3年的有31份(22.6%)，凍存3年以上的有23份(16.8%)。臍血采集后制備過程中，細(xì)胞回收率平均為82.9%(40.0%～95.6%)，復(fù)蘇后細(xì)胞活力(活細(xì)胞比例)平均為87．4%(67.0%～99.0%)?；颊?/span>輸入的有核細(xì)胞數(shù)為(8.13士4.95)×10/kg，CD34細(xì)胞數(shù)為(2.66-4-2.78)×10/kg。

四、定義和標(biāo)準(zhǔn)

1．移植后造血重建：外周血中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)連續(xù)3d≥0.5×l0/L為粒系造血重建；在未輸注血小板的情況下，連續(xù)3d外周血PLT≥20×10⁹/L為血小板重建；粒系重建后采用染色體原位雜交(FISH)或短串聯(lián)重復(fù)序列．聚合酶鏈反應(yīng)(STR—PCR)檢測供受者嵌合體。

2．植入失敗：指移植后60d內(nèi)未重建造血，或供受嵌合體檢測不到供體成分。

3．急性GVHD的診斷和分級(jí)：參照文獻(xiàn)[1]標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行GVHD的診斷和分級(jí)。

4．細(xì)胞回收率：是臍血復(fù)蘇后與液氮凍存前有核細(xì)胞比例。

5．細(xì)胞活力：深低溫凍存的臍血經(jīng)復(fù)蘇后，經(jīng)錐蟲藍(lán)染色測得的活細(xì)胞比例。

五、結(jié) 果

1．SUCBT的植入及造血重建情況：0～2年組19例患者發(fā)生植入失敗，2年以上組12例患者發(fā)生植入失敗，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P=0．927)。0—2年組中性粒細(xì)胞重建的中位時(shí)問為16(9～37)d，血小板重建的中位時(shí)間3O(1O～94)d；2年以上組 的中性粒 細(xì)胞重建中位時(shí)間14(7～40)d，血小板重建中位時(shí) 間為 33(17～79)d，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.203，P=0.310)。

2．急性GVHD及治療相關(guān)死亡(TRM)：兩組患者急性GVHD發(fā)生率分別為51.6%和 61.9%(Jp= 0.574)，TRM率分別為43.4%和 29.6%(JD=0.124)。對(duì)植入失敗、TRM 進(jìn)行多因素分析，相關(guān)因素分別為HLA配型、預(yù)處理方案、輸注細(xì)胞數(shù)、年齡、 原發(fā)病、移植年份(2011年及以前/2011年以后)、臍血凍存時(shí)間。年齡、移植年份是治療相關(guān)死亡的2個(gè)危險(xiǎn)因素，TRM在年齡越大的患者中發(fā)生率越高

(RR=2.830，95%CI1.127～7.104，P=0.027)，2011年以后移植的患者比以前的 TRM率較低(RR=O.203，95％C10.088～0.468，P<0.001)。其他因素未發(fā)現(xiàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3．UCBT后生存情況：移植后死亡52例，失訪11例，中位隨訪時(shí)間為799(215～2656)d。死于嚴(yán)重感染25例、復(fù)發(fā)8例、重度GVHD6例、出血5例、多器官功能衰竭2例，6例患者死亡原因不詳。移植的臍血保存時(shí)間在0～2年和2年以上的兩組患者，5年生存率分別為55.6％和 698％(P=0.124)(圖 A)；20l1年及 以前移植的患者OS率為48.7％，2011年以后移植的患者OS率為79.6％，兩組 OS率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Jp=0．001)(圖 B)。

六、討 論

1989年報(bào)道了世界上首例USCT，短短20余年，全球已開展2000余例UCBT。UCBT治療的疾病譜越來越廣。本研究137例sUCBT患者，所涉及的原發(fā)病種類包括白血病、骨髓衰竭性疾病、實(shí)體腫瘤、遺傳性疾病(免疫缺陷、代謝性疾病、地中海貧血、范可尼貧血)等。本組病例以兒童為主，0～16歲患者為 113例 (82．5％)。多因素分析提示 UCBT在兒童患者中預(yù)后較好，年齡越大，TRM率越高(RR=2．830，P= 0．027)。歐洲臍血庫2014年亦進(jìn)行大樣本sUCBT 的報(bào)道，也提示年齡增大是與死亡相關(guān)的高危因素之一 。柳葉刀雜志在2007年報(bào)道了國際血液和骨髓 移植研究中心(CIBMTR)的一項(xiàng)對(duì)照研究結(jié)果，兒童 sUCBT的療效與骨髓移植相當(dāng)。國內(nèi)臨床移植專家提出，對(duì)于缺乏HLA相合骨髓供體的患者，UCBT也是較好的可供選擇的移植方案。除年齡以外，本研究中與TRM有關(guān)的另一個(gè)危險(xiǎn)因素是移植的年份。2011年以后移植的患者，5 年OS率達(dá)79.6％，與2007至2011年移植患者 OS率 (48.7％)相比有顯著提高。一項(xiàng)來自韓國13個(gè)移植中心的報(bào)道，1996至2006年進(jìn)行 UCBT的 236例兒童患者5年OS率為47.5％。孫自敏等報(bào)道的40例UCBT治療惡性血液病2年OS率為58．8％。近年來UCBT預(yù)后顯著改善，主要原因是HLA高分辨配型的普及優(yōu)化了臍血的選擇，新藥的應(yīng)用及臨床預(yù)處理、支持治療水平的提高，患者及家庭經(jīng)濟(jì)實(shí)力的改善。本研究用于移植的137份臍血，60．6％凍存時(shí)間( 血采集日期至移植日期)在2年以下，對(duì)凍存 2年以下及2年以上的臍血復(fù)蘇后細(xì)胞活力及UCBT造血重建時(shí)間、植入失敗率、急性 GVHD發(fā)生率、TRM進(jìn)行比較，結(jié)果提示，凍存時(shí)間長短對(duì)細(xì)胞活力、移植預(yù)后無顯著影響。黃璐等研究了20份液氮深低溫保存1～20年的臍血標(biāo)本，結(jié)果提示，凍存的降溫和復(fù)蘇過程會(huì)造成細(xì)胞數(shù)量下降，但移植效果不受影響。國外有學(xué)者提出，復(fù)蘇后活細(xì)胞比例下降，主要是分化成 熟細(xì)胞的丟失，因此不影響造血干細(xì)胞的植入。

綜上所述，USCT已被廣泛應(yīng)用 于多種疾病的治療。近兩年來，UCBT臨床療效有明顯改善，小于16歲的患者 比成人預(yù)后更好。臍血凍存時(shí)間對(duì)復(fù)蘇后細(xì)胞活力、移植的預(yù)后無顯著影響。

摘自：

中華血液學(xué)雜志 2015年 2月第 36卷第 2期 ChinJHematol，F(xiàn)ebruary2015，Vo1．36，No 2

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